Сайт для тех, кого интересуют достоверные результаты клинических анализов.

Роль полимеразной цепной реакции в этиологической диагностике урогенитальных инфекций у мужчин

Чочия С.В.

Медицинский центр «Асклепий», г. Владивосток

Частота определения возбудителей бактериальных и вирусных инфекций, вызывающих воспаление органов малого таза и участвующих в инфицировании половым путем в большей степени зависит от чувствительности и специфичности диагностических методов, применяемых для выявления инфекций, передаваемых половым путем (ИППП) (1,2). Непатогномоничность клинических форм ИППП, отсутствие возможности использования высокочувствительных методов лабораторной диагностики ведет к недооценке этиологической значимости патогенов в этиологии воспалительных заболеваний урогенитальной сферы у мужчин. В связи с этим, особую важность для диагностики приобретают лабораторные методы на основе новых технологий.

Целью настоящего исследования явилось изучение частоты выявления возбудителей ИППП методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) у мужчин г. Владивостока, обратившихся в медицинский центр для уточнения этиологии урогенитальных заболеваний.

Всем пациентам в программу обследования включали андрологический осмотр, исследование соскоба эпителиальных клеток уретры и секрета предстательной железы. Проанализированы 914 урогенитальных образца, собранных путем соскобов из уретры (606), секрета предстательной железы (280) и эякулята (28).

Материал для лабораторного исследования собирался путем сбора уретрального содержимого с 4-х часовым воздержанием от мочеиспускания и капли секрета предстательной железы, свободно стекающей из уретры на стерильное стекло сразу после мочеиспускания. Такой забор материала исключал контаминацию секрета предстательной железы уретральным содержимым.

Этиологический диагноз устанавливался методом полимеразной цепной реакции с использованием видоспецифических праймеров Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Trichomonada vaginalis и др. (реактивы и оборудование производства научно-производственной фирмы “ДНК-технология”, г. Москва, Россия).

Результаты исследования показали, что в уретре мужчин среди выявленных патогенных микроорганизмов, первое место занимают C.trachomatis (15,43%), реже выявлялась Т.vaginalis (10,57%) и ещё реже Neisseria gonorrhoeae (2,35%). Условно-патогенные микроорганизмы выделены со следующей частотой: U.urealyticum – в 18,20%, Mycoplasma hominis – в 10,58% случаев. Gardnerella vaginalis выделена из уретры мужчин в 29,32% случаев. Среди вирусных инфекций чаще выделяли вирус папилломы человека (HPV) 16 типа (28,57%), в два раза реже HPV 18 типа (14,28%), цитомегаловирус (CMV) выделен в 10,38% и вирус простого герпеса (HSV) – в 7,5% случаев.

Определение возбудителей ИППП в секрете предстательной железы и эякуляте чрезвычайно затруднено в связи с высоким содержанием в них различных ингибиторов, затрудняющих использование диагностических тестов, таких как прямая иммунофлюоресценция и ELISA-тест (3). Внедрение в клиническую практику метода ПЦР позволило уточнить этиологический фактор при простатите, эпидидимите, простатовезикулите.

Наши исследования показали возможность выявления микроорганизмов в таком биологическом материале, как секрет предстательной железы и эякулят, методом ПЦР.

В секрете предстательной железы у мужчин микроорганизмы выделены с той же закономерностью, что и в уретре: C.trachomatis – 13,33%, T.vaginalis – 9,37%, N.gonorrhoeae – 3,84%, U.urealyticum – 20,11%, M.hominis – 13,63%. Намного чаще из секрета предстательной железы выделена G.vaginalis – 41,17%.

Частота обнаружения возбудителей вирусных инфекций (вируса простого герпеса 1-II типов, цитомегаловируса и вируса папилломы человека 16, 18 типов) варьировала от характера материала, полученного от пациентов. Оказалось, что HSV 1-II типов чаще обнаруживается в секрете предстательной железы, чем в уретре (16,66% против 7,5%). Следует отметить, что CMV, HPV 16-18 типов в секрете предстательной железы не выделены ни из одного образца, в то время как HSV 1-II типов - в 2,2 раза чаще, чем в уретре.

Особый интерес представляют данные по выявлению возбудителей ИППП в эякуляте. Так из 12 проб 2 были положительные на присутствие C.trachomatis, из 10 проб – в трёх случаях выделены U.urealyticum, и 4 из 5 были положительные на присутствие T.vaginalis.

Результаты исследования свидетельствуют о значительной этиологической роли нетрадиционных возбудителей в воспалении органов малого таза мужчин. Среди патогенов частой причиной воспаления мочеполового тракта у мужчин является C.trachomatis. У мужчин все вышеперечисленные микроорганизмы чаще выявляются в предстательной железе, особенно G.vaginalis, которая определялась в 1,41 раза чаще в секрете, чем в уретре. Полученные сведения свидетельствуют о глубине поражения органов малого таза. Присутствие представителей условно-патогенной флоры класса Mollicutes (M.hominis и U.urealyticum) в урогенитальном тракте у всех пациентов расценено как этиологический фактор, участвующих в развитии воспаления. Это подтверждалось наличием высокого титра U.urealyticum, превышающего 10 4 КЦЕ (количество цветовых единиц).

Полученные сведения позволили изменить структуру возбудителей инфекционно-воспалительного процесса гениталий, представленную ранее при обследовании подобного контингента с использованием других методов для их выявления (4). Так было показано, что в структуре урогенитальных инфекций наибольший удельный вес приходился на хламидийную инфекцию – 55,79±1,48%, на остальные инфекции приходились: микоплазмоз – 9,97±0,89%, генитальный герпес – 6,01±0,71%, уреаплазмоз – 5,39±0,64%, гарднереллез – 4,76±0,64%, гонорея - 0,72±0,24% случаев. Смешанная урогенитальная инфекция была выявлена в 17,34±1,12% случаев. Диагностика представленных инфекций проводилась с использованием методов микроскопии мазка (гарднереллез и гонорея), прямой иммунофлюоресценции (хламидиоз, микоплазмоз и генитальный герпес).

Таким образом, метод полимеразной цепной реакции существенно расширил возможности диагностики ИППП, что позволило по-новому представить этиологическую роль бактериально-вирусных инфекций в структуре заболеваемости урогенитального тракта мужчин.

Список литературы:

1. Akovbyan V.A., Kubanova A.A., Intzukha M.V. et al. Epidemiology of

urogenital chlamydiosis in the Russia Federation. In book: “Proc. of III meeting European Soc. to Chlamydia Res.”. Austria, Viena. 1996, p.398.

2. Y.T.H.P. van Duynhoven, M.J.W. van de Laar, J.S.A. Fennema et al. Development and evaluation of screening strategies for Chlamydia trachomatis infections in an STD clinic. Genitourin Med, 1995, 71, р. 375-381.

3. Mazzoli S., Askienazy-Elbhar M., Meacci F. Et al. Prevalence of Chlamydia trachomatis chronic infection in men detected by DNA amplification by PCR and secretory antibodies in semen: a European multicentric study. In: Proc. of III meeting Europ. Soc. to Chlamydia Res. Austria, Vienna, 1996, p. 407.

4. Дьяков И.А., Дидова Т.Н. Частота встречаемости урогенитальных инфекций у мужчин, наблюдавшихся в Приморском краевом диагностическом центре. В: Здоровье населения Дальнего Востока. Владивосток, «Уссури», 1996, с. 145.
разместил: admin || 25-07-2011, 05:55